葡萄酒中蘋果酸的測定(doc 16頁)

原理:
利用MegaQuantTM (專利技術)測定L-蘋果酸需要進行三步酶解反應，第一步：在L-蘋果酸脫氫酶(L-MDH)的催化作用下，L-蘋果酸被煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)氧化生成草酰乙酸：
(1) L-蘋果酸 + NAD+ (L-MDH) oxaloacetate + NADH + H+
第二步：加入過剩的L-穀氨酸，在穀草轉氨酶的作用下，生成L-天門冬氨酸和2–酮戊二酸
(2) Oxaloacetate + L-glutamate (GOT) L-aspartate + 2-oxoglutarate

第三步：在心肌黃酶的催化作用下，NADH還原碘硝基氯化四氮唑(INT)，生成甲基- INT
(3) NADH + INT + H+ (diaphorase) NAD+ +甲基-INT
生成的甲基- INT的量取決於L-蘋果酸的量，甲基- INT的吸光度值可在505nm下測量。
特異性, 靈敏度, 測量範圍和精確度:
該實驗方法是專門用於測定L-蘋果酸含量的。

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